CHR-6494

MCE 国际站：CHR-6494

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1333377-65-3

纯度：0.9807

货号：HY-15217

存储条件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年溶剂中 -80°C 1 年 -20°C 6 个月

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：CHR-6494 是一种有效的选择性 haspin 抑制剂，IC50 值为 2 nM。CHR-6494 能够抑制组蛋白 H3T3 的磷酸化。CHR-6494 可用于癌症的研究。

体外：CHR-6494（0-10-5 nM；72 小时）剂量依赖性地抑制癌细胞的生长，例如 HCT-116、HeLa、MDA-MB-231 和 Wi-38 细胞，IC50 分别为 500 nM、473 nM、752 nM 和 1059 nM[1]。CHR-6494（500 nM）产生有丝分裂灾难，有丝分裂纺锤体形态异常，着丝粒扩增，并上调纺锤体组装检查点蛋白 BUB1 和有丝分裂停滞标志物细胞周期蛋白 B1[1]。CHR-6494 对黑色素瘤细胞系表现出抑制活性，包括 BRAFV600E 突变体、NRAS 突变体和野生型细胞，IC50 范围为 396 nM 至 1229 nM[2]。CHR-6494（300 nM 和 600 nM；72 小时）诱导细胞凋亡，在 COLO-792 细胞中分别使 caspase 3/7 活性增加 3 倍和 6 倍，在 RPMI-7951 细胞中分别增加 8.5 倍和 16 倍[2]。CHR-6494 与 MEK 抑制剂联合使用可协同抑制黑色素瘤细胞活力，增强黑色素瘤细胞凋亡，通过在不同阶段阻止黑色素瘤细胞独立调节细胞周期进程，并抑制黑色素瘤细胞迁移[2]。CHR-6494 (50、200 nM； 1周）可增强MLN8237对MDA-MB-231、SKBR3乳腺癌细胞的抗增殖作用[3]。CHR-6494（200 nM；72小时）与MLN8237联合使用可增强MDA-MB-231和SKBR3细胞的凋亡[3]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

体内：CHR-6494（50 mg/kg，腹腔注射，连续5天，共15天，分2个周期）可抑制HCT-116人结肠癌细胞裸鼠的肿瘤生长，且不引起明显的体重变化[1]。与对照组相比，CHR-6494（20 mg/kg，腹腔注射，连续15天）可抑制MDA-MB-231异种移植瘤裸鼠的肿瘤体积和重量[3]。CHR-6494（20 mg/kg，腹腔注射，连续15天）可增强MLN8237（20 mg/kg，口服）在体内对肿瘤体积和重量的抑制作用[3]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

动物实验：4-5 周龄的无胸腺 nu/nu 雄性小鼠用于肿瘤异种移植试验。动物饲养在无菌环境中；笼子、食物和垫料均采用高压灭菌器进行灭菌。麻醉小鼠，皮下注射肿瘤细胞。总共将 3.5 × 106 个指数生长的 HCT-116 细胞稀释在 250 μL 无菌 PBS 中，然后皮下注射到每只动物 (n = 30)。记录体重，并使用数字卡尺每周测量两次肿瘤尺寸。根据公式 V = D × d2/2 估算肿瘤体积（单位为 mm3），其中 D 是肿瘤的长轴，d 是肿瘤的短轴。当肿瘤达到平均 200 mm3 体积时（注射后 15 天），将 24 只具有均匀肿瘤大小的小鼠随机分成两组：（1）对照组（n = 8）用载体（10% DMSO/20% 2-羟丙基-b-环糊精溶液）治疗；（2）治疗组（n = 16）小鼠每天腹膜内注射 50 mg/kg 的 CHR-6494（稀释在 10% DMSO/20% 2-羟丙基-b-环糊精溶液中），连续五天两个周期，共治疗 15 天。治疗组随机分为短期反应组（n = 8），以对照组杀死时的肿瘤重量定义，以及长期反应组（n = 8），以治疗后肿瘤再生定义。治疗结束时杀死小鼠，切除两组肿瘤并称重。以每组小鼠的平均值±sem表示，显著性通过Mann-Whitney U检验进行评估。P值[1]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：用抑制剂或 DMSO（作为对照）处理细胞 24、48 和 72 小时。使用比色 XTT 测定法评估细胞活力。将细胞以每孔 4 × 104 细胞的密度接种在 94 孔板中，并使其附着 24 小时。然后将培养基与含有不同药物浓度（0.001-10 μM）的其他培养基交换。每个浓度的 CHR-6494 化合物使用 8 个孔。在相应的时间，排出培养基，添加 XTT 试剂并确定最终细胞数和光密度。生成剂量反应曲线并在处理 72 小时后评估细胞活力。使用 GraphPad Prism 软件[1] 确定半数最大抑制浓度 (IC50)。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：使用基于磷酸化和非磷酸化肽对蛋白质裂解的不同敏感性的 FRET 检测法（Z′-LYTE 激酶检测法）来分析化合物在 29 种蛋白激酶中的酶抑制能力。在初级反应中，激酶将 ATP 的 γ-磷酸转移到合成 FRET 肽中的单个酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基上。在次级反应中，位点特异性蛋白酶识别并裂解非磷酸化的 FRET 肽。FRET 肽的磷酸化可抑制显影试剂的裂解。裂解会破坏 FRET 肽上供体（香豆素）和受体（荧光素）荧光团之间的 FRET，而未裂解的磷酸化 FRET 肽则维持 FRET。比率法用于定量反应进程，即在 400 n 处激发供体荧光团后，计算供体发射与受体发射的比率（发射比）[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：haspin 2 nM (IC50)

参考文献：

[1]. Huertas D, et al. Antitumor activity of a small-molecule inhibitor of the histone kinase Haspin. Oncogene. 2012 Mar 15;31(11):1408-18.[2]. Han L, et al. Anti-Melanoma Activities of Haspin Inhibitor CHR-6494 Deployed as a Single Agent or in a Synergistic Combination with MEK Inhibitor. J Cancer. 2017 Aug 25;8(15):2933-2943.[3]. Chen A, et al. CRISPR/Cas9 screening identifies a kinetochore-microtubule dependent mechanism for Aurora-A inhibitor resistance in breast cancer. Cancer Commun (Lond). 2021 Feb;41(2):121-139.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。